Leveduras isoladas de uvas Vitis vinifera L. cultivadas na região equatorial brasileira / Yeasts isolated from Vitis vinifera L. grapes cultivated in Brazilian Equatorial region

O Vale do Submédio São Francisco, localizado nos estados da Bahia e Pernambuco, é uma das regiões mais promissoras na produção de vinho no Brasil. É ainda desconhecida a possibilidade dessa região em produzir vinhos por fermentação espontânea e gerar produto com características típicas regionais. Neste estudo foram isoladas e identificadas as leveduras da superfície de uvas Vitis vinifera L. frescas, cultivadas na região do Vale do Submédio São Francisco, Brasil. Os isolados foram identificados pelas características morfofisiológicas, habilidade de crescimento em meio de cultura ágar L-lisina e identificação bioquímica, baseando-se em testes fisiológicos (habilidade de fermentação da glicose, assimilação de fontes de carbono e nitrogênio, osmotolerância e termotolerância). Sessenta isolados de leveduras foram obtidos no meio ágar extrato de malte-extrato de levedura (YM); e todos foram pertencentes ao grupo não-Saccharomyces. Por meio de testes fisiológicos, 20 dos 60 isolados não foram agrupados em nenhum gênero. 40 dessas leveduras foram sugestivamente identificadas como pertencentes ao gênero Hanseniaspora spp. Dessas 40 amostras, 17 receberam sugestiva identificação como pertencentes à espécie Hanseniaspora guilliermondi. Em conclusão, a microbiota da casca das uvas cultivadas nessa região é predominada por leveduras não Saccharomyces, especificamente Hanseniaspora spp.

Differentiation between Candida albicans and Candida dubliniensis using hypertonic Sabouraud broth and tobacco agar / Diferenciação entre Candida albicans e Candida dubliniensis usando caldo Sabouraud hipertônico e ágar Tabaco

INTRODUCTION: Opportunistic fungal infections in immunocompromised hosts are caused by Candida species, and the majority of such infections are due to Candida albicans. However, the emerging pathogen Candida dubliniensis demonstrates several phenotypic characteristics in common with C. albicans, such as production of germ tubes and chlamydospores, calling attention to the development of stable resistance to fluconazole in vitro. The aim of this study was to evaluate the performance of biochemistry identification in the differentiating between C. albicans and C. dubliniensis, by phenotyping of yeast identified as C. albicans. METHODS: Seventy-nine isolates identified as C. albicans by the API system ID 32C were grown on Sabouraud dextrose agar at 30°C for 24-48h and then inoculated on hypertonic Sabouraud broth and tobacco agar. RESULTS: Our results showed that 17 (21.5%) isolates were growth-inhibited on hypertonic Sabouraud broth, a phenotypic trait inconsistent with C. albicans in this medium. However, the results observed on tobacco agar showed that only 9 (11.4%) of the growth-inhibited isolates produced characteristic colonies of C. dubliniensis (rough colonies, yellowish-brown with abundant fragments of hyphae and chlamydospores). CONCLUSIONS: The results suggest that this method is a simple tool for screening C. albicans and non-albicans yeast and for verification of automated identification.

INTRODUÇÃO: Infecções fúngicas oportunistas em hospedeiros imunocomprometidos são causadas por espécies de Candida, cuja maioria das infecções se deve a Candida albicans. Entretanto, o patógeno emergente Candida dubliniensis demonstra várias características fenotípicas em comum com C. albicans, tais como produção de tubo germinativo e clamidósporos, solicitando atenção por desenvolver resistência in vitro estável ao fluconazol. O objetivo do presente estudo foi avaliar a performance da identificação bioquímica na diferenciação entre C. albicans e Candida dubliniensis, analisando fenotipicamente leveduras previamente identificadas como C. albicans. MÉTODOS: Setenta e oito isolados identificados como C. albicans pelo sistema API ID 32C foram cultivados em ágar Sabouraud dextrose a 30°C por 24-48h e em seguida inoculados em caldo hipertônico Sabouraud e agar tabaco. RESULTADOS: Nossos resultados mostraram que 17 (21,5%) isolados tiveram o crescimento inibido no caldo hipertônico Sabouraud, característica fenotípica inconsistente para C. albicans neste meio de cultura. Entretanto, os resultados observados em ágar tabaco mostraram que somente 9 (11,4%) dos isolados inibidos produziram colônias características de C. dubliniensis (colônias rugosas, marrom-amarelada com fragmentos de hifas e abundantes clamidósporos). CONCLUSÕES: Os resultados obtidos sugerem que este é um instrumento simples para triagem entre leveduras de C. albicans e não-albicans, bem como confirmação de identificação automatizada.

Identificação de bactérias gram-negativas e gram-positivas isoladas de leite cru em pequenas propriedades rurais / Identification of gram-negative and gram-positive bacteria isolated from raw milk on small farms

O objetivo desse trabalho foi isolar e identificar os principais gêneros de bactérias pertencentes à família Enterobacteriaceae, Gram-negativas oxidase positiva, gêneros Staphylococcus e Enterococcus de 16 propriedades rurais do município de Boa Esperança-MG. As bactérias Gram-negativas foram isoladas em meio Eosina Azul de Metileno (EMB) e ágar Entérico Hektoen. Estafilococos foram isolados em agar Baird-Parker e Enterococcus em agar KF.(...) O leite oriundo das 16 propriedades continha cepas de microrganismos fecais como Escherichia coli e Enterococcus do grupo D de Lancefield. Bactérias Gram-negativas oxidase positiva foram identificadas em cinco propriedades. Staphylococcus foram encontrados em 10 propriedades. O leite, coletado nas fazendas investigadas, possuem microrganismos que comprometem sua qualidade.

Comparação entre método bioquímico e reação em cadeia de polimerase para identificação de Lactobacillus spp., isolados de aves / Comparison between biochemical and polymerase chain reaction methods for the identification of Lactobacillus spp. isolated from chickens

Lactobacilos foram isolados do inglúvio e cecos de reprodutoras pesadas e caracterizados como Gram-positivo, catalase negativo, produtores de gás em glicose e não produtores de H2S em triple sugar iron e pela fermentação de carboidratos. Utilizaram-se os iniciadores: Lac 1/23-10C para detecção de Lactobacillus acidophilus, L. crispatus, L. amylovorus, L. gasseri, L. helveticus e L. jensenii; Lac 2/LU-1' para L. acidophilus; Fer 3/Fer 4 para L. fermentum; Reu 1/Reu 2 para L. reuteri e Sal 1 e Sal 2 para L. salivarius. L. reuteri e L. salivarius foram identificados pela reação em cadeia de polimerase (PCR) e pelo teste bioquímico, enquanto L. acidophilus, L. fermentum e Lactobacillus sp. somente pelo teste bioquímico. Os resultados obtidos na PCR foram mais precisos quando comparados aos obtidos com o método bioquímico, que demonstrou ser subjetivo devido às variações na fermentação de carboidratos, principalmente na diferenciação entre L. fermentum e L. reuteri.

Lactobacilli were isolated from crops and ceca of broiler breeders and characterized by positive Gram staining, negative catalase test, production of gas from glucose, and negative for H2S production from triple sugar iron, and carbohydrates fermentation. Primers: Lac1/23-10C for detecting Lactobacillus acidophilus, L. crispatus, L. amylovorus, L. gasseri, L. helveticus, and L. jensenii; Lac2/LU-1' for L. acidophilus; Fer3/Fer4 for L. fermentum; Reu1/Reu2 for L. reuteri, and Sal1/Sal2 for L. salivarius were used. L. reuteri and L. salivarius were identified by both polymerase chain reaction (PCR) and biochemical tests. However, L. acidophilus, L. fermentum, and Lactobacillus sp. were only identified by biochemical tests. PCR results were more precise, considering the variability of carbohydrate fermentation among the strains, especially for identifying L. fermentum and L. reuteri.